宮頸癌是女性最常見(jiàn)的惡性腫瘤，其死亡率僅次于乳腺癌。近年來(lái)，宮頸癌的發(fā)展趨勢(shì)逐漸偏向年輕化且呈逐年上升現(xiàn)象。人乳頭瘤病毒( HPV)感染與宮頸癌有高度相關(guān)性，是宮頸癌的主要致病元兇，研究表明99.7% 的宮頸癌患者存在HPV感染。因此，宮頸癌篩查至關(guān)重要。宮頸癌篩查項(xiàng)目中，臨床上以HPV檢測(cè)和TCT檢查較為常見(jiàn)。
HPV基因組介紹
HPV是一種雙鏈的小DNA病毒，具有7900個(gè)堿基對(duì)，由病毒蛋白外殼和核心DNA物質(zhì)構(gòu)成，無(wú)包膜。病毒基因組分為3個(gè)部分：早期基因區(qū)（E）、晚期基因區(qū)（L）及將早期區(qū)與晚期區(qū)分開(kāi)的長(zhǎng)調(diào)控區(qū)（LCR）。調(diào)控區(qū)主要調(diào)控病毒的轉(zhuǎn)錄，控制病毒蛋白和感染顆粒的產(chǎn)生。早期區(qū)編碼E6、E7、E1、E2、E4和E5蛋白質(zhì)，主要參與病毒DNA的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄。晚期區(qū)編碼L1、L2蛋白質(zhì)，分別是病毒的主要和次要衣殼蛋白[1]。
E6、E7基因的致癌機(jī)理
早期區(qū)（E區(qū)）編碼蛋白基因中，由E6、E7基因編碼的致癌蛋白是導(dǎo)致宮頸上皮癌變的重要因子，編碼的致癌蛋白是導(dǎo)致宮頸上皮癌變的重要因子，這兩種蛋白與細(xì)胞內(nèi)兩種主要抑癌蛋白p53和pRb的結(jié)合以及調(diào)控可以明顯改變細(xì)胞生長(zhǎng)周期和DNA修復(fù)，由此導(dǎo)致的基因組不穩(wěn)定性是細(xì)胞轉(zhuǎn)化和永生化的必要條件，見(jiàn)下圖[2]。
HPV導(dǎo)致宮頸病變的過(guò)程圖示
在CIN I期及之前，HPV主要以游離狀態(tài)存在于宿主細(xì)胞中，在病變進(jìn)一步發(fā)展的過(guò)程中，HPV基因組會(huì)整合到宿主細(xì)胞基因組，隨著病變程度的增加，HPV最終以整合狀態(tài)存在。整合之后，L1基因常常丟失，而E6/E7基因持續(xù)存在。
L1 與E6/E7分別作為檢測(cè)靶點(diǎn)的區(qū)別
從低級(jí)別病變發(fā)展為癌的過(guò)程中，HPV基因組會(huì)發(fā)生整合。在整合過(guò)程中，E6/E7基因持續(xù)存在，L1基因可能會(huì)丟失，有漏檢風(fēng)險(xiǎn)。
· 對(duì)56個(gè)浸潤(rùn)性宮頸癌組織活檢樣本分別用L1區(qū)通用引物和E6-E7分型引物進(jìn)行檢測(cè)比較發(fā)現(xiàn)，有23個(gè)樣本存在L1區(qū)缺失[3]。
· 研究發(fā)現(xiàn)，HPV 18的L1/E1區(qū)更容易丟失。幾乎所有的HPV18陽(yáng)性的宮頸癌中病毒基因組整合到人基因組上；而HPV16陽(yáng)性的宮頸癌中也有≤60%的病毒基因組發(fā)生整合[4]。
· 一項(xiàng)基于15,774例病人樣本的研究發(fā)現(xiàn)，跟型別特異性E6/E7引物PCR比較，通用引物MY09/11 PCR檢測(cè)會(huì)造成10.9%（522例）的漏檢；409例由MY09/11 PCR檢測(cè)結(jié)果為陰性的病人中，隨訪發(fā)現(xiàn)最終有104人（25.4%）發(fā)展為CIN2+[5]。
相對(duì)于以L1基因作靶點(diǎn)，以E6/E7基因作檢測(cè)靶點(diǎn)，可以避免由于HPV基因組整合到人基因上造成的漏檢。因此，致癌基因E6/E7更適合作為HPV DNA檢測(cè)的靶點(diǎn)。（生物谷Bioon.com）
[1] 胡家昌. 高危型HPVDNA與宿主基因整合及致癌機(jī)理的相關(guān)研究進(jìn)展. 現(xiàn)代婦產(chǎn)科進(jìn)展, 2015, 24(5):384-386
[2] CB Woodman, SI Collins, LS Young The natural history of cervical HPV infection: Unresolved issues. Nature Reviews Cancer,?2007,?7(1):11
[3] F Karlsen, M Kalantari, A Jenkins, E Pettersen, G Kristensen Use of Multiple PCR Primer Sets for Optimal Detection of Human Papillomavirus. Journal of Clinical Microbiology, 1996, 34(9):2095-2100
[4] Human papillomavirus is a necessary cause of invasive cervical cancer worldwide. Journal of Pathology, 1999, 189(1):12
[5] Comparison of MY09/11 consensus PCR and type-specific PCRs in the detection of oncogenic HPV types. Journal of Cellular & Molecular Medicine,?2007,?11(4):881-891
